夜间班机因旅客大都熬夜熬得双眼通红，故得名为红眼班机。勒克斯大西洋酒店的高级行政人员丽莎（瑞秋•麦克亚当斯 饰）今天不得不搭乘她最不喜欢的红眼班机，因为她参加完祖母的丧礼后，次日就要上班。丽莎的运气还不错，在机场遇到了英俊潇洒的杰克逊（希里安•墨菲 饰），两人相谈甚欢。更让丽莎惊喜的是，两人搭乘的是同一趟红眼班机，而且还相邻而坐。丽莎万万没有想到，原本温文尔雅的杰克逊露出了他的狰狞面目。

歌手瑞特打算前往纳什维尔去追寻自己的梦想，却不忍心就此与深爱的女友萨曼塔分手。而萨曼塔也很困惑，她虽然很爱瑞特，但是觉得对于自己和女儿来说是很好的未来，对瑞特却不一定适合。与此同时，瑞特和萨曼塔之间的矛盾也影响到了周围的人们……

一架来自欧洲的班机，为了政治任务要飞越美国领空。在机上，总统候选人史都特（大卫·海迪生 饰）带了一片可以结束战争的磁片，同行的还有空军队长杰克（布莱恩·伯茨沃斯 饰）。磁片中有美国副总统杰若从事不法军火交易的证据。但就在飞机降落之前，由杰若指使的恐怖份子挟持了这架飞机，并杀掉了机长和机员，飞机陷入混乱状态。美国空军接白宫指示，派出战斗机攻击被挟持的飞机，飞机同时受到战斗机及恐怖份子的围攻，并且失去控制，又无法与地面电台联络。机上乘客的唯一希望在杰克身上，但身为空军队长的他竟然不会开这架飞机，他能化解这场危